酶活檢測試劑盒基于高度水溶性的四唑鹽進(jìn)行測定

　　酶活檢測試劑盒測定過(guò)程中所需要的儀器和試劑：可見(jiàn)分光光度計、1mL玻璃比色皿（光徑10mm）、研缽／勻漿器、可調式移液器、臺式離心機、恒溫水?。囵B箱和蒸餾水。

 

　　基于高度水溶性的四唑鹽進(jìn)行測定。WST－8在電子介體的作用下可還原生成水溶性甲瓚產(chǎn)物，產(chǎn)生顏色反應。WST－8被細胞中的脫氫酶還原而生成橙色產(chǎn)物（甲瓚），可溶于組織培養基中。細胞中脫氫酶產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物的量與活細胞的數量成正比。CCK－8法應用非常廣泛，如藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗以及生物因子的活性檢測等。

 

　　細胞活性是判斷體外培養細胞在某些條件下是否能正常生長(cháng)的重要指標，如藥物處理、放射性或紫外線(xiàn)照射、培養條件變化等。細胞活性檢測方法有很多種，如臺盼藍染色法、克?。洌┬纬煞?、、ATP含量測定法、熒光染色法、比色法（MTT法）等。

 

　　一些熒光染料對死細胞和活細胞有不同的作用效果，利用熒光顯微鏡檢測細胞活性。如碘化丙錠（PI），被活細胞排斥但能穿透正在死亡或已經(jīng)死亡細胞的細胞膜，因此活細胞不被染料染上色，只有死細胞或是凋亡細胞才能染上紅色。

 

　　吖啶橙（AO）能透過(guò)質(zhì)膜完整的細胞，嵌入細胞DNA，使之發(fā)出明亮的綠色熒光。溴化乙錠（EB）僅能透過(guò)胞膜受損的細胞，嵌入DNA，發(fā)橘紅色光。也可應用AO－EB雙染法鑒定細胞活性。這種檢測方法相比傳統的染料，具有靈敏度高，操作簡(jiǎn)便，結果容易分辨等特點(diǎn)，而且利用雙染法還可以分辨活細胞、凋亡早期細胞、凋亡晚期細胞、死亡細胞。在細胞凋亡的檢測上有很廣泛的應用。